緩沖鹽使用不當(dāng)對(duì)色譜柱的影響及解決辦法

　　緩沖鹽使用不當(dāng)對(duì)色譜柱的影響及解決辦法
　　在色譜分析過(guò)程中常常需要使用緩沖鹽來(lái)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值，緩沖鹽的不當(dāng)使用對(duì)色譜柱可能造成柱壓升高、柱效下降以及使化合物的保留時(shí)間發(fā)生變化等影響。
　　1.柱壓升高原因:緩沖鹽使用不當(dāng)導(dǎo)致緩沖鹽析出，堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙，阻礙流動(dòng)相傳質(zhì)，引起柱壓升高；
　　2.相同化合物的保留時(shí)間發(fā)生變化原因:如果沒(méi)有沖洗干凈就進(jìn)行進(jìn)樣，色譜柱內(nèi)含有的鹽會(huì)使化合物保留時(shí)間發(fā)生變化；
　　3.柱效下降原因:a.有些緩沖鹽會(huì)滲入到鍵合相的深處，損害硅膠基體，導(dǎo)致色譜柱鍵合相流失，柱床變松，柱效下降；b.凝結(jié)在鍵合相表面，使C18碳鏈難以舒展，對(duì)物質(zhì)的保留能力下降。因此，用過(guò)緩沖鹽后需要對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗，水中緩沖鹽濃度較大時(shí)應(yīng)特別引起注意。
　　流動(dòng)相中緩沖鹽的正確使用方法
　　1.使用前的處理:在使用緩沖鹽作流動(dòng)相之前需要用不含緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗色譜柱，直至基線平穩(wěn)。原則上用于沖洗的流動(dòng)相與分析所用的流動(dòng)相含水的比例相同（或者含水更多），不同的是用于沖洗用的流動(dòng)相中不含緩沖鹽。理由:緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。用含緩沖鹽的（特別是做流動(dòng)相的水為飽和的緩沖鹽溶液時(shí)）流動(dòng)相進(jìn)行分析時(shí)，如果分析前色譜柱中用于保存色譜柱的流動(dòng)相中含水的比例相對(duì)較小，不先沖洗掉，接下來(lái)做樣品的時(shí)候所用的流動(dòng)相中如果有機(jī)溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩沖鹽時(shí)，緩沖鹽將會(huì)在色譜柱上析出，沉積下來(lái)，這將可能導(dǎo)致上述對(duì)色譜柱的傷害。
　　2.使用后的處理:用于分析時(shí)含水比例相同的流動(dòng)相（與分析所用流動(dòng)相*的區(qū)別是用于沖洗的流動(dòng)相不含緩沖鹽）進(jìn)行沖洗約30min，直至基線平穩(wěn)。如果該色譜柱在接下來(lái)很長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)不使用，要長(zhǎng)期保存，則需再加上一步，即用純的有機(jī)溶劑沖洗一邊，直至基線平穩(wěn)。緩沖液可以提供離子平衡的反離子，并使流動(dòng)相保持一定的離子強(qiáng)度和ph值，減少拖尾。